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艾滋病病毒滅活檢測

作者:小編 更新時間:2022-04-22 點擊數:

艾滋病病毒滅活檢測介紹

艾滋病病毒滅活檢測機構哪家數據比較準確?飛凡檢測多年來致力于打造出國內專業的第三方檢測公司,也在不斷的進行學習,對于檢測的項目收費比較合理,成為了上千家企業的選擇,同時飛凡檢測機構還與多家科研所進行合作,取得了較好的成就。公司對各種病毒檢測技術也在不斷的提高,其中對HIV病毒滅活檢測有專業的技術和設備。


HIV病毒滅活檢測方法之懸液定量滅活試驗操作程序

1))從液氮中取出凍存的MT4 細胞,在 37℃溫水中迅速融化,并用細胞維持液洗滌兩次后,轉種于加有10ml 完全培養基培養瓶中。逐日觀察細胞生長情況,在細胞對數生長期時收獲細胞用于消毒試驗。2)從液氮中取出凍存HIV-1毒種,接種于含10ml細胞懸液(含細胞700 000個/ml~800 000個/ml)培養瓶中。逐日觀察病變,待3/4細胞出現病變時,收獲病毒。收獲時,將培養液取出,盡快離心,并將含病毒的上清液按每管0.5ml分裝于無菌離心管(1.5ml)中,冷凍保存于-80℃備用。如不能立即離心,可暫將培養瓶冷凍保存于-20℃,并爭取盡快離心分裝。

3)取待測消毒劑,用無菌去離子水作1:2、1:4、1:8...系列稀釋。視消毒劑的類型和實驗目的,確定最高稀釋度。為防止污染培養液,必要時在試驗前需將消毒劑過濾除菌。

4)取50u l待檢消毒劑,與50u l病毒原液混合。在規定溫度作用一定時間(根據試驗要求確定作用時間和溫度),立即加入0.9ml用完全培養基制備的MT4 細胞懸液(400 000個/m1),在37℃,放置40min,以確保殘留病毒全部吸附在細胞上。陽性(病毒)對照組試驗中,用無菌去離子水代替消毒劑;消毒劑對細胞毒性組試驗中,用無菌去離子水代替病毒。

5)取出反應管,立即采取去除殘留消毒劑處理。處理可用物理去除法或中和劑法(所用方法需先經試驗證明,既可有效去除殘留消毒劑,又對細胞和 HIV無殺滅或抑制作用。

6)在96孔培養板上滴定樣本中殘留的病毒量。先在培養板(96孔)的各孔中,加入100u l用完全培養基制備的MT4 細胞懸液(含細胞400 000個/ml)。同時,用完全培養基對待滴定樣本做1:10 系列稀釋,然后取100u 1稀釋好的樣本加入已含MT4 細胞懸液的96孔培養板內。每個稀釋度做4孔。

7將按上述程序加液的96孔培養板,放入二氧化碳培養箱中(37℃,5% CO2),逐日在顯微鏡下觀察細胞病變。被感染細胞融合腫脹,出現多核巨細胞。第4 d,在各反應孔內補加50u l新鮮完全培養基。第7d,逐孔觀察并記錄細胞病變情況。

8)試驗重復3 次。


評價規定

1)對測試滴度的HIV,3次滅活試驗后均應不再檢出,此時的滅活對數值應≥4.00,可判為該消毒劑濃度與作用時間,對HIV污染物消毒的實驗室試驗合格。

2)在正常情況下,HIV陽性對照組病毒感染滴度(TCID.o)對數值應在5~7之間。陰性對照組宿主細胞生長良好,并且無HIV 檢出。所用濃度的消毒液對宿主細胞生長無不良影響。否則,根據發現的問題,或調整HIV懸液濃度,或選擇適宜消毒液濃度,或更換污染試劑和培養基,或改進其他有關條件后,重做試驗。


注意事項

1)操作人員應具有較豐富的病毒學實驗工作經驗,必須絕對遵守BSL3實驗室的安全制度。身體狀態欠佳,或有傷口時,應暫時停止工作。2)有感染可能性的操作,均應在 BSL3實驗室的層流負壓超凈工作臺中進行。

3)一旦發生事故,有病毒感染或污染環境的可能時,切莫驚慌,除立即進行妥善消毒處理外,并應盡快報告實驗室和單位領導。

4)本試驗周期較長,在全部過程中應注意防止樣本污染。


飛凡檢測質檢報告流程

1、 提供產品資料

2、 工程師根據您品資料的產品推薦合適檢測項目,并給出報價

3、 確認報價沒有問題,然后把樣品送到我們實驗室

4、 支付檢測費用,安排檢測

5、檢測完成,出具檢測報告,郵寄給客戶

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飛凡檢測致力于打造國內專業的第三方檢測服務公司,不斷優化整合市場檢測資源,飛凡檢測與多家科研院所,如上海同濟大學,蘇州大學,SGS,TUV,以及國內眾多知名的檢測公司進行深度合作,共同為國內制造業服務,為中國的制造業開拓海外市場保駕護航,為我們日常生活的健康安全樹立標桿;公司目前工程師百余人,95%以上是本科以上學歷;我們合作的實驗室通過CNAS,CMA(EZ),所出具的任何一張報告都有CNAS,CMA資質,確保出具的每份報告都具有權威的法律效力。



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