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犬腺狀病毒滅活檢測

作者:小編 更新時間:2022-04-28 點擊數:

犬腺狀病毒滅活檢測項介紹

CAVⅡ型病毒滅活檢測哪家機構收費比較合理?飛凡檢測結果是一家信譽度較高的第三方檢測機構,獲得了國家的認可公司,經過多年來的發展,已經與上千家的企業進行合作。同時公司還與更多的科研所和大學進行長久的合作,為更多的客戶提供準確性的數據報告。


狂犬病病毒糖/核等結構蛋白的重組CAVⅡ型病毒的免疫原性

1.在 MDCK細胞上大量制備狂犬病病毒糖/核等結構蛋白的重組犬2型腺病毒,測定TCIDso。以無免疫史的家犬為受試動物,每條犬肌肉注射0.2ml TCIDs.為10°的重組病毒;同時以犬2型腺病毒疫苗株免疫犬作為對照組。

2.免疫后1周開始每隔1周采集和分離免疫犬及對照犬血清一次。

3.采用間接ELISA方法,即以純化的狂犬病病毒作為抗原包被酶標板,待檢免疫犬血清與之反應,再以辣根過氧化物酶標記的羊抗犬二抗結合并顯色。結果表明,重組病毒免疫后狂犬病病毒(糖/核等結構蛋白)特異性抗體顯著升高。

4.采集核蛋白重組苗免疫后4周犬的抗凝血液,按2×0.1ml分裝入2個離心管中,加入紅細胞裂解液,感作后離心,沉淀用0.2mlPBS 懸浮,將FITC標記的羊抗犬CD4+和 CD8+抗血清分別與PBS懸浮的白細胞4℃感作1h,經 PBS洗滌⒉次后懸浮進行FACS檢測。結果表明,免疫犬CD4+數量較對照組顯著增高,CD4+/CD8+比值顯著增加。說明,重組苗中核蛋白誘導了水平較高的細胞免疫。


狂犬病病毒糖/核等結構蛋白的重組CAVⅡ型病毒誘導產生抗體的中和試驗作用及免疫保護作用

取前一試驗中對照組及免疫組犬血清各100 u l,各與35 LDa狂犬病強毒CVS細胞毒混合,室溫孵育3h后,后肢皮下注射BALB/c乳鼠各40只,每只10ul,觀察4周。結果顯示,與對照組犬血清共孵育的CVS造成全部40只乳鼠發病死亡,而重組病毒免疫犬血清孵育組無發病致死。說明該重組CAV-2誘發機體產生的糖/核等結構蛋白抗體具有顯著的中和作用。

從以上結果可以得出,本發明的積極效果在于重組病毒是通過將攜帶狂犬病病毒糖/核等結構蛋白表達盒的重組全基因組 DNA 序列轉染犬⒉型腺病毒E3區易感細胞(即MDCK 細胞系)中獲得的。其無需進行大量復雜的病毒分離、鑒定和純化工作。同時本重組疫苗除了具有犬2型腺病毒的生物學和免疫學特征以外,還展現了狂犬病病毒糖蛋白或核蛋白的免疫學特性,即除了可刺激機體產生針對犬腺病毒的免疫力以外,還可產生針對狂犬病病毒的免疫力,實現了外源基因的持續穩定表達。


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