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      itraq蛋白質組學

      作者:小編 更新時間:2022-05-07 點擊數:

              iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技術是由AB SCIEX公司研發的一種體外同重同位素標記的相對與絕對定量技術。該技術利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或賴氨酸側鏈基團,經高精度質譜儀串聯分析,可同時比較多達8種樣品之間的蛋白表達量,是近年來定量蛋白質組學常用的高通量篩選技術。

        iTRAQ標簽簡圖以及定量方法見下圖:

       

       

        該技術采用4種或8種同位素編碼的標簽,通過特異性標記多肽的氨基基團,爾后進行串聯質譜分析,可同時比較4種或8種不同樣品中蛋白質的相對含量或絕對含量。iTRAQ的4種同位素標記試劑由4種相對分子質量分別為114、115、116和117的報告基團(reporter group),相對分子質量分別為31、30、29 和28 的質量平衡基團(balance group)以及一個相同的肽反應標記試劑基團(peptide reactive group)組成。不同的報告基團分別與相應的平衡基團相配后,相對分子質量均為145,即等量異位標簽(isobaric tag)。其原理是首先將蛋白質裂解為肽段,然后用iTRAQ試劑進行差異標記。

        同位素標記試劑結構為:


      1、數據產出統計

      2、蛋白質鑒定結果

      3、蛋白質定量結果

      4、蛋白質GO分析

      5、蛋白質COG分析

      6、蛋白質Pathway代謝通路分析

      7、差異蛋白GO富集分析

      8、差異蛋白的Pathway富集分析



      1、待檢測蛋白要求:完整無明顯降解的總蛋白,蛋白量最低300ug,濃度最低為5ug/ul,使用二維電泳試劑提??;

      2、直接提供組織或細胞,細胞樣品,細胞量> 107;組織樣品,動物、微生物組織濕重>10mg;植物鮮嫩組織>100mg;體液樣品,血液體積>500ul;后續操作全部由天科生物來做,您只需要提供樣本,其他試劑都無需提供;

      3、蛋白運輸:24小時內可以4度運輸;

      4、蛋白長期保存:-20℃。

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